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离子交换高效液相色谱法分析HbA1c方法的建立

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Johnson
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Johnson

--Johnson--
北京沫之东生物技术有限公司
http://www.coreab.cn
2582
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中国
--Johnson--
Johnson
18-5-29 上午6:45

离子交换高效液相色谱法分析HbA1c

当葡萄糖在βN-末端结合形成HbA1c时,血红蛋白分子发生构象变化,导致分子呈现额外的负电荷。这意味着在离子交换色谱系统中,它将从正常血红蛋白(HbA0)和通常与HbA0共洗脱的赖氨酸侧链糖基化的血红蛋白中分离出来。

通过对色谱方法和仪器(HPLC)的改进,血红蛋白被常规分离成许多峰,如HbA1a,HbA1b,HbF(胎儿血红蛋白),HbA1c,HbA0,HbA2和一些与其他分子反应产生的血红蛋白产物谷胱甘肽,尿素,阿司匹林等)。

还有一些血红蛋白降解产物出现在已老化的样品中。在一些HPLC系统中,这些可能与HbA1c共洗脱或不完全分离。在这些情况下,获得的HbA1c值可能会高于实际值。新鲜血液样品含有大量不稳定的HbA1c,这些HbA1c在一些较早的分析仪中通过预孵育步骤被除去。较新的分析仪将不稳定形式与稳定的HbA1c分开,不需要预先孵育样品。

使用离子交换HPLC的平台包括BioRad D-10,Diastat,Variant,Variant II和Variant Turbo; TOSOH 2.2 Plus,G7,G8,Menarini Arkray Adams HA 8160.HbA1c对照的完整性对于这些方法更为关键,因为任何降解都会导致可能与HbA1c共洗脱(和共同整合)的干扰峰的增加。由于这个原因,对于这些方法可用的重构或开瓶时间可能小于免疫测定程序。


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